MI培养基原理及实验现象

一、用途：

  用于滤膜法计数饮用水中大肠埃希氏菌和大肠菌群。

 

二、实验原理：

  MI琼脂中的蛋白胨可以为细菌生长提供氮、碳和氨基酸。酵母提取物提供微量元素，维生素和氨基酸。乳糖是一种可发酵的碳水化合物碳源。氯化钠保持渗透平衡。磷酸一钾和磷酸二钾具有缓冲作用。十二烷基硫酸钠和去氧胆酸钠可抑制革兰氏阳性细菌。

  大肠杆菌产生的β-D-葡萄糖醛酸酶将显色剂吲哚氧基-β-D-葡萄糖醛酸（IBDG）切割成蓝色或靛蓝色化合物。大肠菌群产生的β-半乳糖苷酶可裂解氟化物4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷，生产4-甲基伞形酮，一种荧光化合物，当暴露于长波紫外线（366nm）时，可出现荧光反应。琼脂作为固化剂。

  头孢磺啶钠可抑制革兰氏阳性细菌和一些非大肠菌群革兰氏阴性细菌生长。

 

三、培养基配方（g/L）：

  略

 

四、试验方法：

  1、称取本品 36.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶 200ml,121℃高压灭菌 15min,冷至 50℃左右时,每瓶加入一支头孢磺啶钠(1mg/支),混匀,倾入无菌平皿,备用。

  2、制备质控菌液。

  3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，使用膜进行接种过滤技术，每一稀释度接种两个平板。

  4、35±2℃下培养20-24小时，记录实验结果。

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五、结果观察与解释

  接种以下质控菌株，在35±2℃下培养20-24小时：

 

图1-2  MI培养基微生物质控结果

 

六、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

 

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